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B2 酵 素 純 化 與 分析

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蛋白質科技

表 2.1  各種鹽析及沉澱法的比較：

蛋白質分子表面的帶電基團  

蛋白質分子表面的非極性基團

除 hydrophobic 之外的其他作用力  

NaCl (單價離子)  

硫酸銨 (兩價離子)

甲醇、丙酮等有機溶劑

蛋白質在其 pI 下，因淨電荷為零而聚集沉澱；若加入鹽類，會阻礙其聚集而增加溶解度。

(pI):等電點

硫酸銨的兩價離子，在溶液中搶走附在蛋白質表面 (非極性部分) 的水分子，使得非極性部分相互吸引而聚集沉澱。

降低水活性，使溶液的介電常數下降，增加蛋白質溶質分子之間的作用力，而聚集在一起。  

圖 2.3

圖 2.4

圖 2.5

對較低濃度緩衝液進行 透析是 salting in 的反向過程。

1)  非極性蛋白質較早沉澱下來。 

1)  部分蛋白質會變性。

2)  在硫酸銨中蛋白質相當穩定。

2)  有助沉澱的因素：蛋白質分子量大、緩衝液 pH 靠近 pI。

3)  脂溶性蛋白質的溶解度反而增加。